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    非洲豬瘟檢測方案

    更新時間:2023-05-05      瀏覽次數:1160

    1 非洲豬瘟簡介

    非洲豬瘟(英文名稱:African Swine fever,簡稱:ASF)是由非洲豬瘟病毒(英文名稱:African Swine fever virus,簡稱:ASFV)感染家豬和各種野豬(如非洲野豬、歐洲野豬等)引起一種急性、出血性、烈性傳染病。非洲豬瘟病毒是非洲豬瘟科非洲豬瘟病毒屬的重要成員,病毒有些特性類似虹彩病毒科和痘病毒科。病毒粒子的直徑為175-215納米,呈20面體對稱,有囊膜。基因組為雙股線狀DNA,大小170-190kb。在豬體內,非洲豬瘟病毒可在幾種類型的細胞漿中,尤其是網狀內皮細胞和單核巨噬細胞中復制。該病毒可在鈍緣蜱中增殖,并使其成為主要的傳播媒介。世界動物衛生組織(OIE)將其列為法定報告動物疫病,該病也是我國重點防范的一類動物疫情。

    2 非洲豬瘟在我國的發病情況

    2018年8月3日我國確診非洲豬瘟疫情以來,我國已經在遼寧、安徽、黑龍江、海南等地接連爆發非洲豬瘟疫情。盡管非洲豬瘟傳入我國僅年的時間,但已經在多地接連爆發,造成了巨大的經濟損失,而且非洲豬瘟臨床癥狀與豬瘟癥狀相似,只能依靠實驗室監測確診。在目前的情況下,急需一種能對非洲豬瘟進行快速檢測的方案!

    3 非洲豬瘟病毒(ASFV)實時等溫擴增儀配置清單



    項目

    序號

    物品名稱

    型號規格

    單位

    數量

    備注

    1. 

    儀器主機

    HW-ZW16

    1


    2. 

    儀器使用說明書


    1


    3. 

    合格證/保修卡


    2


    4. 

    儀器電源線


    1


    5. 

    鋁合金箱


    1


    6. 

    電子天平

    0-500g

    1


    7. 

    樣品杯

    50mL

    24


    8. 

    移液槍

    1-5ml

    1


    9. 

    移液槍槍頭

    1-5ml

    1


    10. 

    移液槍

    100μL-1000μL

    1


    11. 

    移液槍槍頭

    100μL-1000μL

    1


    12. 

    移液槍

    10μL-100μL

    1


    13. 

    移液槍槍頭

    10μL-100μL

    1


    14. 

    移液槍

    2μL-20μL

    1


    15. 

    移液槍槍頭

    2μL-20μL

    1


    16. 

    剪刀


    1


    17. 

    鑷子


    1


    18. 

    研缽

    直徑8cm

    1


    19. 

    離心機

    大龍D1008

    1


    20. 

    離心管

    1.5mL

    50


    21. 

    PCR管

    0.2mL

    50


    22. 

    非洲豬瘟病毒熒光等溫擴增檢測試劑

    48T/盒

    5


    23. 

    漩渦混勻器


    1


    24. 

    畜牧恒溫箱

    -10℃~65℃

    1


    25. 

    高速冷凍離心機

    LC-LX-HR165A

    1


    26. 

    研磨儀


    1


    27. 

    移液器(5種型號)


    10


    28. 

    冰箱


    1



    4 非洲豬瘟病毒(ASFV)實時等溫擴增儀技術參數

    赤霉素檢測儀 

    儀器型號

    HW-ZW16

    樣品通量

    16x0.2ml,兼容單管和8聯管

    加熱方式

    半導體制冷片結合電性電阻熱紅外技術

    溫控范圍

    室溫~85℃

    溫控精度

    ±0.1℃

    溫度均一性

    ±0.15℃

    激發光波長

    第一通道:470nm±10nm

    檢測光波長

    第一通道:520nm±10nm

    激發光

    高亮度LED

    檢測器

    新型光學檢測器,結合數字電路控制,光信號穩定

    熒光傳導方式

    太空專用光纖傳導

    結果判讀方式

    根據擴增曲線軟件自動判讀陰陽性

    結果顯示

    可在機器顯示擴增曲線及出峰時間

    檢測時間

    ≤40分鐘

    檢測試劑

    開放式恒溫熒光檢測試劑

    操作軟件

    自帶軟件

    控制方式

    觸屏控制

    檢測項目

    可同時最多檢測16個項目

    檢測靈敏度

    10~109拷貝/反應,且樣品間無交叉污染

    儀器分析功能

    根據所檢測樣品,直接分析判定陽性或陰性;也可通過標準品進行絕對定量

    軟件設置功能

    可選擇反應程序;可對反應程序進行設置,如可設置反應時間、可在反應過程中修改反應時間(縮短或延長)、可設置不同溫度,每個溫度檔位差為0.1℃;可將反應程序保存為模板;可對不同孔進行重命名;可設置掃描間隔時間,范圍為 18~60S,默認間隔為 60S;可設置陰陽性判斷閾值;閾值線可上下拉動等

    工作環境溫度

    18~35℃

    儲存溫度

    -20℃~55℃

    環境相對濕度

    ≤85%

    工作電壓

    100~240V,50~60Hz

     

    5 非洲豬瘟病毒熒光等溫擴增檢測試劑盒技術參數

    作用與用途:用于血液、血球粉、淋巴結、脾臟、扁桃體以及豬肉產品中非洲豬瘟病毒核酸的檢測。

    1.規格:48次/盒;

    2.保存條件:-20℃保存;

    3.組成:熒光等溫擴增免提取反應液:1100ul;Bst DNA聚合酶:75ul;陰性對照:1000ul;陽性對照:200ul;礦物油:1000ul;說明書:1份;

    4.有效期:12個月;

    5.本試劑盒適用于便攜式熒光定量PCR儀檢測箱及各種其他型號熒光定量PCR儀;

    6.反應體系:25ul;反應時間:1h;報告基團:FAM;淬滅基團:None;

    7.結果判定:有明確判定標準,被檢樣品熒光信號有指數型增長,陽性對照Tt值≤45并出現典型的擴增曲線,陰性對照無Tt值并且無擴增曲線即S型擴增曲線,結果成立;被檢樣品Tt值≤45并出現典型的擴增曲線為陽性;被檢樣品無Tt值并且無典型擴增曲線為陰性;被檢樣品Tt值在45-60之間并出現典型的擴增曲線為可疑。對于可疑結果應重新檢測,如果樣品FAM通道仍有典型S型擴增曲線且Tt值≤60,則判定為陽性,否則為陰性;

    8.本試劑盒經中國動物疫病預防控制中心評價,診斷敏感性100%,特異性100%;

    9.該產品為疫控(診)【2019】74號文件中推薦的產品;

    10. 產品生產廠家具有分子生物學類診斷制品GMP車間。


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